为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
在之前发布的“叮咚!收下这份慢病毒包装的全攻略”和“慢病毒稳转细胞株的构建”两篇文章中,我们已经了解了慢病毒可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而可以在体内长期表达,且慢病毒可有效地感染包括几乎所有的哺乳动物细胞、干细胞和原代细胞。当我们知道了慢病毒是如何包装的,当我们拿到了包装好的慢病毒之后,该怎么进行下一步操作呢?
腺病毒是一种球形、无包膜病毒,直径约70~90nm,衣壳呈20面体立体对称结构,由252个壳粒组成,其中240个为六邻体,另外12个为五邻体,位于衣壳表面的纤维状刺突是以五邻体蛋白为基底,由衣壳表面伸出的12根纤毛,纤毛顶端形成头节区,五邻体和纤毛的头节区可与细胞表面的受体结合,在病毒感染细胞过程中起着非常重要的作用。
中国科学院广州生物医药与健康研究院李志远团队研究发现人脐带血来源间充质干细胞可以通过mTOR靶向途径促进TFEB核转位激活自噬溶酶体功能,减少细胞内累积突变蛋白ataxin-3的含量,起到改善神经细胞功能,促进神经发生的作用。