该细胞会使培养基快速变酸,且生长缓慢,故传代后 48 小时内不应扰动; 普通TC处理的培养瓶或皿不能使细胞很好的贴壁,培养难度较高,需使用 Corning 的 cellbind 细胞培养瓶,或者使用多聚-L-赖氨酸溶液包被过的培养皿;
原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是极好的工具。
用镊子把刚才置于保温杯的冻存管取出,并立即放入上述准备好的水浴中,用镊子镊好冻存管,快速沿着容器内壁转圈,细胞未冻融时切勿取出观察,细胞冻融时间一般为1-2 min,如果超过2min仍未冻融,应弃用该管细胞,冻融后立即用70%酒精消毒该冻存管,然后立即放入超净工作台中;
过程:离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→试管苗 ―→植物体。概念:在实验室工厂化生产的条件下,将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中,进行悬浮培养,得到分散游离的悬浮细胞,通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量的细胞群体的一种技术。
胰蛋白酶消化后,用EDTA分散从皮肤片分离的表皮片,然后用添加bFGF的无血清培养液培养。对于某些供体的皮肤,先在4°C条件下孵育18~24 h,然后在37°C条件下孵育1~2 h,这样可获得较多的黑素细胞。