即在碱性 pH 下,DNA 分子均变性,恢复中性时,线性染色体 DNA 由于两条链分开且 基因组分子量大,单链互相无规则缠绕,不能准确复性,就与其他成分共沉淀,而质 粒 DNA 分子小且两条闭合环状分子即使变性也较紧密的缠绕在一起,准确复性而留于上清溶液中。
实验材料:香蕉、玻璃杯、清水、酒精、食盐、擀面杖、牙签、纱布实验步骤:1、将香蕉放在杯子中,用擀面杖将香蕉破碎。2、在香蕉中加入食盐、清水,用擀面杖继续按压。3、我们将得到的溶液用纱布过滤,将纱布及上方的香蕉果肉移走。4、向过滤后的溶液中加入酒精,用牙签慢慢搅拌。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕形成网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
一、碱变性法提取质粒DNA质粒(plasmid)是细菌染色体外能自主独立复制的双股环状DNA,带有遗传信息,可赋予细菌某些新的性状。将质粒指纹图谱分析方法、质粒DNA探针技术及检测质粒的PCR技术用于临床感染性疾病的诊断和流行病学调查已成为现实。
近年来,我们经常会在科普杂志和流行杂志中读到关于DNA的文章,在新闻和刑侦类电视剧中也常常提到DNA。DNA全称为脱氧核糖核酸,是携带基因信息的分子。它能够自我复制,能够合成RNA(核糖核酸)。在比较高级或复杂的生命形式中,DNA存在于细胞核中。
实验过程1、实验试剂溶液Ⅱ0.2Ml NaOH / 1% SDS;异丙醇,无水乙醇,75%乙醇应放-20℃冰箱预冷备用;酚氯仿放4℃冰箱预存;菌液12000rcf离心5min,弃掉上清,加入0.2ml溶液I,充分混匀后,加入0.25ml溶液II,颠倒混匀,室温放置5min,加入0
一. 采集抗凝血作为检测样本:血液样本的采集建议您请专业的医护人员帮助您,取1-2毫升抗凝血,装于EDTA抗凝管中,并做好标记。采集血液样本的注意事项1. 血液需要装在EDTA抗凝管中,不能使用肝素抗凝的抗凝管。2. 每个人的血液需要单独存放于一个抗凝管中,不能混合,并做好标记。
来源网络整理,侵删!一、大肠杆菌感受态细胞(E.coli DH5α)制备1、前夜接种受体菌(DH5或DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜(约16小时);2、取1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中,在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.